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Cytation5细胞成像微孔板检测系统为用户提供了完备而灵活的成像方式并具备强大的图像处理功能, 足以和显微镜和成像系统相媲美。广泛的成像应用、灵活可升级的模块化设计以及具有竞争力的价格,使Cytation5可以配合各类实验室的应用。其独特的Gen5数据分析软件功能强大, 操作界面友好,使用便捷,并可以与其他自动化设备进行对接。
1、全自动显微镜&多功能微孔板检测仪:
(1)自动XY载物台 样品定位和载物台移动简单而准确
(2)自动LED 可达99%强度输出
(3)自动曝光 为全板提供均衡曝光强度
(4)基于用户定义的自动聚焦 可提高聚焦的重现性并可根据不同用户的不同需求选择聚焦方式2、多功能微孔板检测
Cytation5的微孔板检测功能可以完成荧光强度、时间分辨荧光、荧光偏振、AlphaScreen®/AlphaLISA®、 发光和紫外/可见吸收光检测。Hybrid技术将基于滤光片和光栅的检测光路整合于一套系统之中,为用户提供了强大的孔板检测功能,满足细胞水平和其他生物化学分析的检测要求。
3、模块化可升级设计
Cytation5采用模块化的设计,因此便于客户根据具体实验需求任意选择功能模块的组合,并且可以在未来 进行其他功能模块的升级。
4、四大核心功能:
(1)培养:Cytation5可以配合优异的气体控制模块,为细胞生长提供适合的CO2/O2环境, 另外可以通过程序控制环境的温度,可达65ºC,并且具有线性、轨道和双轨道等震荡模式可选,程序控制震荡 的强度和持续时间。一套独立的双自动加样器可以随时为实验操作提供准确的试剂加样操作,尤其对于那些加样后 需要立即检测的实验,是非常实用而有效的功能模块。
(2)成像:Cytation5可提供很简单快速的细胞成像,其多样的检测功能包括:倒置荧光成像、 明场及H&E染色成像、相差成像等。配合气体控制、多种检测耗材和丰富的检测模式,使Cytation5成为一套强大的细胞成像检测工作站。Gen5软件可以提供简单方便的图像捕获操作,不论是聚焦、LED强度还是曝光均可全自动完 成。16bit科学级CCD采用索尼公司的芯片,同时配合高质量光学元件可以提供优异的图像质量。
(3)检测:Cytation5的孔板检测模块应用更为广泛,其多功能检测系统可以完成荧光强度、时间 分辨荧光、荧光偏振、Alpha检测、发光以及紫外/可见吸收光的检测。所有检测模式均兼容6-384孔板。如果在实验流 程中随后加入细胞成像操作,Gen5软件的Hit Pick功能可以根据检测信号的强度阈值来挑选出目标孔进行成像。 以上流程既提高了效率又极大的减少了数据分析量,同时也节省了数据的存储空间。
(4)计数:Cytation5可以通过Gen5软件进行定量检测和图像采集与分析。只需轻点鼠标即可轻松完成微孔板内培养细胞的计数工作。细胞计数和成像统计均可以自动完成,其分析选项灵活而强大,无论是细胞培养板 还是玻片,均可胜任。
5、强大的孔板检测性能
(1)温控模块:Cytation5配备了BioTek的4-Zone温控技术,具有高达65ºC的温控范围和在37ºC时±0.2ºC 的优异温控准确性。自然对流的加热方式可有效降低边缘效应,当实验板带盖或被封闭,可以通过在板顶和板底分别设定差异温度来有效降低凝集现象的产生,这一先进的抗凝集技术,可有效避免凝集现象对实验检测结果所产生的干扰。
(2)先进的震荡模式:Cytation5具有线性、轨道和双轨道三种不同的震荡模式,以满足不同样品的检测需求,线性震荡为ELISA等实验分析提供强力的震荡效果;轨道震荡相对温和,可以为贴壁细胞类的实验提供保护;而双轨道震荡则提供不同方向的震动,以保证细胞和细菌样品处于悬浮状态。无论何种震荡模式,用户均可以通过程序设 定来震荡的频率和时间。
(3)光栅检测带宽连续可调:Cytation5配备了新一代光栅系统,其带宽9-50nm连续可调1nm步进, 与传统光栅系统的固定带宽相比,能够更好的配合荧光染料的特性,并且可灵活调整激发与发射侧光栅的带宽,以 保证不同荧光染料检测的灵敏度。
(4)跳跃加样与检测:具有超级灵活的加样和检测模式,用户可以根据样品的实验排布或孔板使用的情况,选择任意孔进行操作。
(5)高密度孔域扫描:对于不均一样品或细胞培养样品,需要对全孔的信号进行扫描并计算均数, Cytation5可实现高达99x99的矩阵扫描,用户可根据矩阵图判断样品的信号分布并自动给出均数。
6、典型应用:
细胞成像与分析、细胞增殖、细胞毒性、蛋白表达、分子标记定量、药物研发、基因表达、药物吸收与代谢、生物药物研发与筛选、环境监测、食品安全、核酸定量、蛋白定量、细胞迁移、细胞计数、H&E染色成像、亚群分析、Hit筛选等
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常规:
孔板类型:6-1536孔板
其他耗材:玻片,细胞培养瓶(T25),细胞培养皿,微量检测板
温度控制:4-Zone温控模块,zui高温控 65°C,具有抗凝集功能,温控精度±0.2°C@37°C
震荡模式:线性,轨道,双轨道
软件:Gen5图像数据获取及高级分析软件
自动化:兼容BioSpa8、BioStack及第三方自动化设备
气体控制:范围:0-20% (CO2),1-19% (O2);分辨率:±0.1% (CO2和 O2);稳定性:±0.2% @ 5% CO2;±0.2% @1% O2;可选CO2和O2或仅CO2控制
成像:
相机:Sony16-bit 灰阶CCD,125万像素,0.3μm/像素点@20x
像素点尺寸:6.45μm
相机整合:2x2Binning可选
曝光时间:5ms-4s
成像模式:荧光场,明场,彩色明场,相差及数码相差
成像方式:单色,多色,蒙太奇,时间延迟,Z-轴层切,触发模式
图像处理:Z-轴叠加,数码相差,图像拼合
位置控制:Joystick控制和软件控制
自动功能:用户定义自动聚焦,自动聚焦,自动曝光,自动LED强度
色彩模块:机载4位用户可置换色彩模块,18种色彩可选
物镜位置:6位用户可置换物镜
可选物镜:1.25x,2.5x,4x,10x,20x,40x,60x;相差物镜: 4x,10x,20x,40x
聚焦方式:基于图像、基于激光的自动聚焦和用户自定义聚焦
采集速率:10帧/秒 ,单色,全分辨率;20帧/秒,单色,2x2Binning
拍摄速度:
96 孔板,单色,4x物镜:基于图像 6 分钟;基于激光<3分钟
96 孔板,三色,4x物镜:基于图像12 分钟;基于激光<7分30秒
图像输出:
原始图像:16bit TIFF
保存图像:TIF,JPG,BMP,PNG,EMF,GIF
视频:MP4,WMV
视频制作:实时视频或队列图片合成视频
孔板检测:
光源:高能量氙灯,用于吸收光/荧光检测;100mW激光器,用于Alpha检测
波长选择:四光栅;深度阻挡滤光片
波长范围:200-850nm
带宽选择:9-50nm连续可调,1nm步进
检测器:双PMT
动态范围:>7个数量级
荧光灵敏度:0.25pM(0.025fmol/孔 384孔板)
发光灵敏度:10amol (闪光);100amol(辉光)
BRET:可以
偏振灵敏度:1.2mP
时间分辨荧光灵敏度:Eu 40 fM(4amol/孔 384孔板)
吸收光波长选择:双光栅单色器
吸收光波长范围:230-999nm,1nm步进
吸收光带宽:4 nm (230-285 nm),8 nm (>285 nm)
吸收光动态范围:0-4 OD
吸收光分辨率:0.0001 OD
检测速度:96孔板11秒;384孔板22秒
自动加样器:
数目:2个
支持模式:所有模式
分液体积:5-10000μL,1μL步进
孔板类型:6-384孔板,细胞培养皿
分液zh'q性:≤2% @ 50-200 μL
分液准确性:±1μL或2%
物理:
功率:zui大250W
体积:长50.8 cm x 宽41.91 cm x 高44.5 cm
重量:80 lbs (36.3 Kg)
标准:CE和TUV 认证,RoHS 兼容 -
一、细胞成像应用
1、人U-2 OS细胞采用BacMam法转染后的细胞成像及转染效率分析
组织细胞瞬时转染的常规方法是在培养的细胞中引入新型的基因元件。但是,在向许多组织细胞中引入外源DNA的操作过程中,实验转染效率主要依赖于引入基因的适量表达。这篇应用中,我们介绍在活细胞中采用BacMam基因传递系统和Cytation细胞成像多功能微孔板检测仪,优化和评估基因表达和转染效率。
2、活细胞呼吸与线粒体功能实时监测
呼吸与代谢是细胞正常功能的重要指示剂,可作为研究线粒体功能的参数以及作为触发氧化磷酸化转化为有氧糖酵解标志因子。LuxcelTM公司采用特殊的荧光标记探针,可以实时监测细胞外耗氧率、细胞外产酸率以及细胞内氧含量,用于评估活细胞电子传递链和糖酵解通路的活性。
3、高通量RNAi细胞芯片库分析
采用专利的RNAi成像芯片板,每张芯片上含有3200个完全独立的SiRNA微点,每个微点上包含了介导SiRNA进入微点区域培养细胞的试剂。所有微点矩阵排列并具有编号,每个微点代表一个独立的RNAi实验,因此可以实现芯片式高通量RNAi成像分析。
4、利用3D肿瘤细胞侵袭法进行yao物筛选
全新的3D细胞培养技术可以诱导细胞按照正常的组织构架和通信网络进行生长,大量应用于体外的yao物筛选实验。本文采用3D细胞培养技术,促使肿瘤细胞与其他成分细胞抱团生长成为肿瘤样球体,通过微孔板的相关操作,利用明场及荧光场的分层成像与叠加对肿瘤抑制剂的代谢与残留进行分析,并在3D细胞团的基础上进行kang肿瘤侵袭yao物的筛选评估。
5、基于血细胞计数板的自动化活/死细胞计数
细胞计数是常规的生命科学实验之一。在日常细胞传代和进行细胞学实验时,都需要对细胞进行计数。虽然有多种仪器设备可以进行自动化的细胞计数工作,但使用血细胞计数板仍是成本很低的方法。通过使用配备相差成像模块的Cytation5可以实现血细胞计数板的细胞计数工作。这一自动化的方法相对人工计数更为准确。除此之外,通过台盼蓝染色细胞成像还可获得细胞存活比率的数据。
6、利用相差成像技术对细胞形态及凋亡进行分析
基于细胞表型或基于细胞、组织、器官效应的分子yao物筛选可追溯到比较早的yao物研发。其中基于凋亡的表型研究也是其中的重点,尤其是在肿瘤研究方面,可以帮助研究人员了解疾病的发病机制和探索可能的治liao手段。Cytation5的相差成像模块和气体控制模块相配合,可以无需任何外界干预手段(如标记、固定、裂解等),动态细胞成像,并通过细胞圆度的分析,对细胞凋亡情况进行评价。
二、微孔板检测应用
Cytation5以其独特的光路设计保证了检测的灵活性和高灵敏性,可以适用于几乎所有的非同位素检测技术,包括Alpha技术 (AlphaScreen/AlphaLISA)、荧光偏振 (FP)、时间分辨荧光 (TRF)、荧光强度、发光及吸收光检测。
1、信号通路研究:Alhap筛选、TRF以及FP技术都可以用于信号转导通路研究,包括激酶研究、分子间相互作用以及翻译后修饰。
2、离子通道研究:采用荧光或发光的标记方法,可以和细胞内的钙离子进行特异性的识别,并改变其发射光光谱特性,配合快速检测的自动加样装置,可以保证离子流检测的准确。
3、报告基因研究:满足带有注射器的闪烁发光检测,GFP检测,基于荧光的报告基因检测和基于发光的BRET检测。
4、酶学研究:具有7个数量级的动态范围及短间隔、长时间的快速动力学检测,满足各类酶学研究的需求。
5、基因分型研究:基于滤光片系统的荧光偏振模块可用于SNP的基因分型研究。
6、细胞增殖及毒性研究:由于具有微孔板检测的所有技术,可以配合功能模块进行基于标记或ATP的细胞增殖及毒性研究。
7、定量检测:灵活方便的吸收光检测模块,包括紫外和可见光检测以及光谱扫描,同时兼容Take3微量检测板,因此适用于DNA、蛋白定量及ELISA定量等。